"Kao što svi znamo, PCR je osnovna eksperimentalna metoda u biokemijskim laboratorijima." Eksperimentalni rezultati uvijek su nezadovoljavajući, što može biti posljedica male kontaminacije PCR plastičnog potrošnog materijala ili eksperimentalnih smetnji uzrokovanih uvođenjem inhibitora. Postoji još jedan vrlo važan razlog: nepravilan odabir potrošnog materijala također će imati veliki utjecaj na eksperimentalne rezultate.
Mnogo je razloga koji utječu na rezultate PCR eksperimenata: obično postoji sljedećih 7 vrsta.
1. Primeri: Primeri su ključ za specifičnu reakciju PCR-a, a specifičnost PCR proizvoda ovisi o stupnju komplementarnosti između početnica i uzorka DNA;
2. Enzim i njegova koncentracija;
3. Kvaliteta i koncentracija dNTP-a;
4. Matrica (ciljni gen) nukleinska kiselina;
5. Koncentracija Mg2+;
6. Podešavanje temperature i vremena;
7. Broj ciklusa;
8. Oprema, potrošni materijal itd.
Među mnogim čimbenicima utjecaja, potrošni materijal je jedan od vrlo važnih čimbenika koji se lako zanemaruju.
Postoje mnoge vrste
PCR potrošni materijal: 8 epruveta, epruvete s malim volumenom, standardne epruvete, bez obruba, polu-okvira, s punim obrubom i niz ploča za PCR i qPCR. Vrlo je teško odabrati, a ima mnogo uobičajenih problema, pogledajmo probleme koje svatko bira
PCR potrošni materijal, i kako ih riješiti?
Zašto se
PCR potrošni materijaluglavnom od PP?
Odgovor: PCR/qPCR potrošni materijal općenito je izrađen od polipropilena (PP), jer je to biološki inertan materijal, površinu nije lako prianjati na biomolekule i ima dobru kemijsku otpornost i temperaturnu toleranciju (može se autoklavirati na 121 stupanj) bakterije a također može izdržati temperaturne promjene tijekom toplinskog ciklusa). Ti su materijali obično u izravnom kontaktu s reagensima ili uzorcima, pa je potrebno odabrati visokokvalitetne materijale i dobre tehnike obrade tijekom procesa proizvodnje i pripreme.