> Blog > Vijesti iz industrije

Zašto stanična kultura najprije lizira crvena krvna zrnca?

2022-12-23

Osnovni uvod
Lizat eritrocita jedna je od najjednostavnijih i najlakših metoda uklanjanja crvenih krvnih zrnaca, odnosno cijepanja crvenih krvnih zrnaca lizatom koji ne oštećuje stanice s jezgrom i može u potpunosti ukloniti crvena krvna zrnca. Cijepanje lizata je blaga metoda uklanjanja crvenih krvnih stanica, koja se uglavnom koristi za odvajanje i pročišćavanje stanica tkiva raspršenih probavom enzima, odvajanje i pročišćavanje limfocita i uklanjanje crvenih krvnih stanica u eksperimentima tkivnih proteina i nukleinske kiseline. ekstrakcija kiseline. Stanice tkiva dobivene lizatom crvenih krvnih stanica ne sadrže crvene krvne stanice, te se mogu dalje koristiti za primarnu kulturu, fuziju stanica, protočnu citometriju, odvajanje i ekstrakciju nukleinske kiseline i proteina itd.

Upute za korištenje
Uzorak stanica tkiva
1. Svježa tkiva su digestirana pankreasom/enzimom ili kolagenazom i dispergirana u suspenziju pojedinačnih stanica, a supernatant je odbačen centrifugiranjem.

2. Uzmite ELS lizat iz hladnjaka na 4°C, dodajte ELS lizat staničnom talogu u omjeru 1:3-5 (dodajte 3-5ml lizata na 1ml zbijenih stanica), nježno otpuhnite i promiješajte.

3. Centrifugirajte na 800-1000 okretaja u minuti 5-8 minuta i odbacite gornju crvenu bistru tekućinu.

4. Istaloženi dio je sakupljen i centrifugiran s Hankovom otopinom ili otopinom kulture bez seruma 2-3 puta.

5, ako krekiranje nije dovršeno/dovršeno, mogu se ponoviti koraci 2 i 3.

6. Stanice za resuspenziju za naknadne pokuse; Ako se ekstrahira RNA, najbolje je to učiniti u otopini pripremljenoj iz koraka 4 koristeći DEPC vodu

Crvena krvna zrnca imaju vrlo kratak životni ciklus, samo 120 dana, ali vrlo brzo reproduciraju krv, au ovom slučaju su posebno sposobna za diobu stanica, i one su stanice koje se najbrže dijele od svih, tako da je ova stanica vrlo vrijedna, pa je vrlo koristan za kulturu stanica. Vrlo je jednostavan, nema nikakve organele u sebi, samo stanične membrane i proteine.

Prethodno:Koje su funkcije ELISA kompleta?

Sljedeći:Zahtjevi za reagensima i osnovni prikaz koncentracije otopine.